PTBP1通过调控FGFR2的可变剪接促进肝癌的发展

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是原发性肝癌的主要类型,是一种早期无明显症状、易发生转移、存活率低的恶性肿瘤.多聚嘧啶区结合蛋白 1(polypyrimidine tract binding protein 1,PTBP1)是一种重要的RNA结合蛋白,可诱导促癌剪接事件的发生.虽然PTBP1 在肝癌细胞中的促癌功能已被证实,但是其介导的促癌可变剪接事件及作用机制尚未得到完全解析.本文利用免疫共沉淀联合质谱分析发现与 PTBP1 结合的蛋白复合体显著富集于编码成纤维细胞生长因子受体 2(fibroblast growth factor receptor 2,FGFR2)的基因可变剪接调控过程.通过RNA免疫共沉淀和定量PCR实验,证实PTBP1 可显著下调肝癌细胞中FGFR2-Ⅲb异构体的水平,上调FGFR2-Ⅲc异构体的水平,促进FGFR2-Ⅲb向FGFR2-Ⅲc的异构体转换.随后,通过 CCK-8、transwell和平板克隆实验,在肝癌细胞系HepG2 和Huh7 中评价了FGFR2-Ⅲb和FGFR2-Ⅲc的肿瘤生物学功能.结果显示 FGFR2-Ⅲb 发挥抑癌功能,而 FGFR2-Ⅲc 发挥促癌功能.机制研究证实,FGFR2-Ⅲb 向FGFR2-Ⅲc异构体的转换显著促进肝癌细胞的上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)及FGFR下游ERK和AKT信号通路的活化.本研究揭示了PTBP1 促进肝癌进展的分子调控机制,为肝癌的防治提供了新的理论依据.