干预P2X7受体对缺血再灌注所致肾脏纤维化的改善作用

目的 探讨干预P2X7受体对缺血再灌注(I/R)诱导肾脏纤维化的影响及可能的作用机制.方法 10只雄性野生型C57BL/6小鼠按随机数字表法分为假手术组(WT-Sham)、缺血再灌注损伤(IRI)组(WT-I/R);10只以C57BL/6小鼠为背景的P2X7受体基因敲除小鼠同样随机分为假手术组(KO-Sham)、IRI伤组(KO-I/R),每组各5只小鼠.采用一侧肾切除、对侧肾蒂夹闭法建立肾IRI模型.假手术组小鼠定位肾蒂但不进行肾切除和肾蒂夹闭.于造模或假手术42 d后收集小鼠肾组织标本.PAS染色观察肾组织结构改变,天狼猩红染色评估肾组织纤维化程度,Western blot法检测肾脏钙黏蛋白E(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,免疫组化法观察肾脏F4/80阳性巨噬细胞浸润情况.结果 小鼠经过IRI 42d后,PAS染色结果显示肾小管萎缩,间质可见大量炎症细胞浸润,天狼猩红染色提示肾组织明显纤维化.与野生型小鼠相比,P2X7受体基因敲除小鼠IRI 42 d后肾小管萎缩程度减轻、炎症细胞浸润减少、肾脏纤维化情况改善.Western blot结果示,与假手术组比较,WT-I/R小鼠肾组织肾小管标记物E-cadherin表达降低,纤维化标记物α-SMA表达升高(P＜0.05);与WT-I/R小鼠比较,KO-I/R小鼠E-cadherin降低程度和α-SMA升高程度均减轻(P＜0.05).免疫组化结果示,小鼠肾组织经过IRI42d后巨噬细胞浸润增多,而敲除小鼠肾组织巨噬细胞浸润程度减轻.结论 IRI可以导致肾组织巨噬细胞浸润和纤维化.干预P2X7受体可减少IRI引起的巨噬细胞的浸润,改善肾组织纤维化,延缓慢性肾脏病进展.