多肽Apelin减轻高糖诱导的肾脏足细胞损伤

目的 探讨多肽Apelin在糖尿病肾病中对足细胞线粒体的保护作用及机制.方法 体外培养人肾脏足细胞系,将细胞分为:对照组(control),高糖(HG)组(葡萄糖 25 mmol/L,48 h),Apelin 干预 HG 组(Apelin-13 1 μmol/L,48 h),Apelin组(Apelin-13 1 μmol/L,48 h).TUNEL染色观察细胞凋亡,Western blot法检测细胞线粒体膜蛋白FUNDC1 的表达量,免疫共沉淀法检测线粒体分裂蛋白DRP1 和FUNDC1 的结合情况.将 8 周龄雄性小鼠分为:对照组(control),糖尿病组(DM,一次性腹腔注射链脲佐菌素 150 mg/kg)以及 Apelin干预 DM组(建模成功后,每日腹腔注射Apelin-13 0.3 μmol/kg),每组 5 只小鼠.PAS染色和透射电镜观察肾脏形态,ELISA试剂盒检测血浆肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平,计算肌酐清除率(Ccr);ELISA试剂盒检测尿液白蛋白和肌酐水平,计算尿白蛋白/肌酐(ACR)值.结果 细胞实验:与对照组相比,高糖组足细胞凋亡数量明显增多,FUNDC1 表达水平升高(P＜0.05),线粒体分裂蛋白DRP1 和FUNDC1 的结合增加.而Apelin干预 HG组和高糖组相比,细胞凋亡数量减少,FUNDC1 的表达量降低(P＜0.05),DRP1 和 FUNDC1 的结合减少.动物实验:对照组小鼠肾脏形态正常和足细胞结构完整,糖尿病组小鼠的足细胞数量减少,足突融合、脱落,Apelin干预DM组小鼠肾脏的病变程度轻于糖尿病组.与对照组相比,糖尿病组小鼠血浆Cr、BUN升高,Ccr水平降低,尿液ACR含量明显增加(P＜0.05).Apelin干预DM组与糖尿病组相比,上述指标有所改善(P＜0.05).结论 多肽Apelin通过抑制线粒体膜蛋白FUNDC1 的表达,维持线粒体稳态,减少足细胞凋亡,具有缓解糖尿病肾病的生物学效应.