电针联合NGF对骨折大鼠血钙水平、愈合程度及EGFR相关通路的影响

目的 探究电针联合神经生长因子(NGF)对骨折大鼠血钙水平、愈合程度及表皮生长因子受体(EGFR)相关通路的影响.方法 选取 50 只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常(A)组、模型(B)组、电针(C)组、NGF(D)组、电针联合NGF(E)组,每组 10 只,对B、C、D、E组采用骨钳截断加克氏针髓内固定法建立胫骨骨折模型,建模成功后,C组给予电针治疗,D组给予骨折部位注射 1 500 U的NGF,E组给予电针联合NGF治疗,A组不建模,A组、B组同期给予灌胃同体积生理盐水,X线摄片检测大鼠骨折愈合程度,苏木素-伊红(HE)染色法检测骨组织病理形态,全自动生化仪检测血钙水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中NGF含量,免疫印迹法检测大鼠骨组织中EGFR蛋白表达.结果 与A组相比,B组骨折断端边缘清晰,可见明显骨折线,无骨痂生长且骨折处骨质密度降低;与B组相比,C组骨折线仍可见但折断端边缘趋于模糊,骨密度有所升高,且可见少量骨痂生长;与C组相比,D组、E组骨折线逐渐消失,骨痂明显增多,骨密度明显升高,且D组可见大部分骨痂长入骨折线,已有骨外膜形成并可见骨连接形成.A组骨组织形态完整,且排列整齐,无坏死区域,B组骨组织形态遭到破坏,出现部分坏死区域,并可见少量纤维组织,C组、D组可见大量肉芽组织生长和新生毛细血管内皮细胞等,并出现大量骨痂及纤维组织,成软骨细胞增生活跃,E组骨组织形态已趋于完整,排列有序且部分已被正常组织替代,出现大量的板层骨连接,形成骨化,钙盐开始沉着;与A组比较,B、C、D、E组血钙水平、NGF含量显著降低(P<0.05),与B组比较,C、D、E组血钙水平、NGF含量显著升高(P<0.05),与C组比较,D组、E组血钙水平、NGF含量显著升高(P<0.05),且E组比D组显著性升高(P<0.05);B、C、D、E组胫骨组织中EGFR蛋白表达按A组显著性升高(P<0.05),与B组比较,C、D、E组中EGFR蛋白在胫骨组织表达显著性降低(P<0.05),与C组比较,D组、E组胫骨组织EGFR蛋白表达显著降低(P<0.05),且E组比D组降低更显著(P<0.05).结论 电针联合NGF具有显著疗效,其可显著促进骨折愈合,提高血钙水平,这与抑制EGFR相关通路相关.