干扰B-Raf基因对绵羊毛囊干细胞增殖和凋亡的影响

于梦琪, 李兰兰, 吕长慧,高霄霄,周李生, 柳楠,贺建宁

Chinese Journal of Animal Science(2023)

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Abstract
本研究旨在探讨编码丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Serine/Threonine-Protein Kinase)的B-Raf基因对绵羊毛囊干细胞(HFSCs)增殖和凋亡的影响.将si-B-Raf转染至HFSCs,通过RT-qPCR实验技术检测B-Raf基因、Erk1/2基因和STAT3基因的表达水平,通过Western Blot实验技术检测B-Raf蛋白、Erk1/2 蛋白、p-Erk1/2 蛋白和STAT3 蛋白的表达水平,通过EdU细胞增殖法和CCK-8 细胞增殖检测法检测HFSCs的增殖情况,通过流式细胞仪检测HFSCs的凋亡情况.结果表明,si-B-Raf转染细胞后,B-Raf基因的表达量显著降低,Erk1/2基因和STAT3基因的表达量也显著降低;Western Blot实验结果表明,B-Raf蛋白、Erk1/2蛋白、p-Erk1/2 蛋白和STAT3 蛋白的表达水平显著降低;EdU和CCK-8 结果发现细胞增殖受到抑制,细胞增殖水平显著下降;流式细胞仪检测到细胞凋亡水平显著上升.综上,干扰B-Raf基因表达显著抑制HFSCs增殖并促进其凋亡,可能是通过MAPK/Erk1/2 通路进行的,研究可为进一步阐明绵羊毛囊发育机制提供科学参考.
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