PON1基因低表达对肝癌细胞增殖和细胞克隆能力的影响

目的 探讨对氧磷酶1(PON1)低表达对肝癌细胞增殖和细胞克隆能力的影响.方法 提取肝癌组织及癌旁正常组织标本RNA测定PON1 mRNA的相对表达水平,ELISA法检测肝癌患者和健康人血清PON1蛋白水平.培养人肝癌细胞系PLC和Huh7,对PLC和Huh7细胞系进行转染,分为对照组和转染组(转染siPON1小干扰RNA进行基因沉默实验),使用实时荧光定量PCR及ELISA法验证转染效率,CCK-8实验检测转染后肝癌癌细胞增殖能力的变化,克隆形成实验检测细胞形成克隆的能力,流式细胞术检测细胞周期,Western blot实验检测AMP活化蛋白激酶(AMPK)信号通路相关蛋白变化.结果 肝癌组织中PON1 mRNA相对表达水平低于癌旁正常组织(P＜0.05),肝癌患者血清PON1蛋白水平低于健康人(P＜0.05).与对照组比较,转染组PON1 mRNA相对表达水平和PON1蛋白水平降低(P＜0.05),细胞增殖能力明显增强(P＜0.05),细胞克隆形成率明显增多(P＜0.05),S期细胞比例明显增多(P＜0.05),p-AMPK表达水平明显降低,p-mTOR表达水平明显升高.结论 PON1表达调控了AMPK信号通路活化并抑制了肝癌细胞增殖.