日本血吸虫Bantam miRNA靶基因Rho相关GTP结合蛋白对雌虫卵巢发育影响的分析

LI Xuxin, XIA Tianqi, LI Shan, Bikash Ranjan Giri, LIU Jingyi, LI Shun, LI Xue, LI Huimin, DU Pengfei,CHENG Guofeng

Chinese Journal of Veterinary Parasitology（2023）

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摘要

为鉴定Rho相关GTP结合蛋白为日本血吸虫Bantam miRNA的靶基因,并初步研究该基因的功能.利用RNAhybrid软件分析Bantam miRNA的靶基因,用3'RACE技术扩增获得靶基因与Bantam miRNA的互作区域,利用荧光素酶报告基因验证靶基因与miRNA的互作,qPCR分析日本血吸虫Rho相关GTP结合蛋白基因在雌虫不同部位的转录情况,再利用RNAi技术初步研究该基因的功能.结果发现:共转染含有与BantammiRNA互作区域的Rho相关GTP结合蛋白的重组质粒和Bantam miRNA mimics可显著抑制荧光素酶的表达;qPCR分析表明日本血吸虫Rho相关GTP结合蛋白在雌虫的上部、卵巢、卵黄腺部均有转录,且在卵巢转录最高.RNAi抑制Rho相关GTP结合蛋白的表达时发现,虫体卵巢结构异常,出现裂纹状空泡,并且产卵量下降.Rho相关GTP结合蛋白(TNN14903.1)为血吸虫Bantam miRNA的靶基因,干扰该基因的表达可导致日本血吸虫卵巢结构异常.

关键词

Bantam miRNA,target gene,ovary,Schistosoma japonicum,development

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