兔出血症病毒和多杀巴氏杆菌嵌合蛋白VP60-PlpE的构建及其免疫原性鉴定

兔病毒性出血症(兔瘟)和兔巴氏杆菌病是对家兔危害最严重的两种疫病.用于防控这两种疫病的二联灭活疫苗存在着生产成本偏高问题.虽然基因工程亚单位疫苗的应用有助于提升二联苗的效力,但是生产成本依然偏高.本研究的目的是获得一种嵌合了巴氏杆菌保护性抗原PlpE的表位的兔出血症病毒VP60重组蛋白.首先通过Bepipred-2.0分析,确定PlpE的免疫显性区域主要位于N端.然后将编码PlpE26-45位、51-95位氨基酸序列的基因片段连接到VP60基因的5'端和3'端,并通过杆状病毒-昆虫细胞表达系统获得嵌合了PlpE表位的重组蛋白VP60-PlpE.血凝试验显示VP60-PlpE具有明显的血凝活性,提示重组蛋白仍然能够形成病毒样颗粒.Western blot实验结果表明VP60-PlpE与PlpE抗血清反应明显.小鼠免疫保护力实验表明VP60-PlpE对巴氏杆菌具有免疫保护力.家兔免疫保护力实验表明VP60-PlpE对兔出血症病毒和巴氏杆菌均具有免疫保护作用.总之,本研究成功构建出一种嵌合了巴氏杆菌保护性表位的兔出血症病毒VP60,为研制更低成本的兔病毒性出血症、兔巴氏杆菌病亚单位疫苗提供了基础.