川芎嗪对H22肝癌小鼠血管生成及KLF4/VEGF/ADAMTS1通路的影响

目的 研究川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对H22 肝癌小鼠血管生成的影响及其分子机制.方法 40 只BALB/c小鼠,皮下接种H22 肝癌肿瘤细胞悬液建立荷瘤模型后随机分为模型组,低、高剂量组(TMP 25,50 mg/kg),阳性对照组(盐酸多柔比星 2 mg/kg),连续给药 10 d.ELISA 检测各组小鼠血清谷丙转氨酶(glutamic-pyruvic transaminase,ALT)、门冬氨酸转氨酶(glutamic oxalacetic transaminase,AST)水平;计算抑瘤率;苏木精-伊红(hematoxylin eosin,HE)染色观察肿瘤组织的病理形态学变化;免疫组化染色观察肿瘤组织的微血管生成,以CD34 标记肿瘤微血管;Western blot检测肿瘤组织中Kruppel样因子 4(Kruppel-like factor 4,KLF4)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、人金属肽酶含血小板反应蛋白(human A disintegrin and metalloprotease,ADAMTS)1 的表达变化.结果 连续治疗10d后,与模型组比较,低、高剂量组、阳性对照组小鼠的肿瘤质量和转氨酶ALT、AST 水平显著下降(P<0.01),癌巢数量减少,肿瘤细胞出现坏死和空泡样表现,肿瘤组织中 KLF4、ADAMTS1 蛋白表达显著增高,而VEGF蛋白表达显著降低(P<0.01).免疫组化染色结果示模型组小鼠肿瘤组织CD34 阳性表达率高,可见大量微血管生成,低、高剂量组小鼠随着TMP剂量的增加,肿瘤血管生成逐渐减少.结论 川芎嗪对H22 肝癌小鼠的肿瘤生长具有一定的抑制作用,该作用与其调控KLF4、VEGF、ADAMTS1 的蛋白表达,进而抑制肿瘤血管生成有关.