低氧促进尿源性干细胞迁移与融合能力的作用研究

目的 体外实验中探讨低氧对尿源性干细胞(Urine derived stem cells,USCs)迁移及融合能力的影响及该过程中细胞骨架结构和极性的改变.方法 常氧(20%)或低氧(3%)条件下培养USCs 48h,应用划痕实验、Transwell实验检测USCs迁移能力;共聚焦显微镜及流式细胞术观察并测定USCs与肝细胞(HP14-19 和HepG2)的融合能力;透射电子显微镜及鬼笔环肽荧光探针观察细胞骨架结构;免疫荧光、流式细胞术及 Real-time PCR 实验检测细胞极性相关蛋白 RhoA、Cdc42 及 Rac1 的表达.结果 与常氧组USCs相比,低氧组USCs的迁移能力及与HP14-19 和HepG2 的细胞融合能力明显提升.透射电镜及鬼笔环肽荧光染色可见低氧处理后USCs细胞骨架重塑,微丝微管排列更加有序且规律.免疫荧光、流式细胞术及Real-time PCR结果提示,低氧组USCs极性相关蛋白RhoA、Cdc42 及Rac1的表达量较常氧组明显增加.结论 低氧处理USCs可促进细胞的迁移及融合能力,其机制可能与细胞骨架的重塑和细胞极性上调有关.