Circulación y caracterización molecular de rotavirus y coronavirus asociados a cuadros entericos en cerdos de maternidad de sistemas intensivos

Las diarreas neonatales constituyen uno de los problemas sanitarios mas importantes durante la etapa de lactancia en explotaciones porcinas intensivas a nivel mundial ya que resultan en grandes perdidas economicas. Las causas de diarrea neonatal son multifactoriales y multietiologicas y en muchas ocasiones la presentacion de los cuadros entericos en las granjas es endemica. Dentro de los agentes mas frecuentemente asociados con diarrea neonatal podemos mencionar a: rotavirus y coronavirus, Escherichia coli, Clostridium perfringens tipos A y C, Clostridium difficile, Cryptosporidium spp. y Cystoisospora suis (Aguirre y col., 2000; Sanz y col., 2007; Cappuccio y col., 2009). El plan de investigacion propuesto se encuentra dirigido al estudio de las causas virales de los cuadros entericos de maternidad y tiene como objetivo investigar la presencia y diversidad genetica de rotavirus (RV) y coronavirus (CoV) de la gastroenteritis trasmisible (TGE) en lechones nacidos en granjas confinadas de ciclo completo de la Republica Argentina. Para esto se realizara en primer lugar la seleccion de 4 granjas porcinas de sistema intensivo que presenten cuadros clinicos de diarrea en maternidad compatible con infeccion viral. Se realizaran muestreos en cada estacion del ano (invierno, primavera, verano y otono) que consistiran en la obtencion de datos de bioseguridad mediante una encuesta, evaluacion clinica poblacional, recoleccion de 30 muestras de materia fecal y realizacion de necropsias de 3-5 lechones con obtencion de muestras de intestino y otros organos con lesion macroscopica para estudios histopatologicos. En una segunda etapa, se realizara la deteccion molecular del genoma viral a partir de las muestras de materia fecal obtenidas, utilizando para la misma la tecnica de reaccion en cadena de la polimerasa (PCR) de rotavirus A, B, C y coronavirus de la gastroenteritis transmisible (TGEv). A partir de estas detecciones se realizara la posterior secuenciacion del genoma para estudios filogeneticos y tecnicas complementarias para evidenciar la presencia de estos agentes: electroforesis en gel de poliacrilamida (PAGE), visualizacion mediante microscopia electronica y aislamiento viral. Por otro lado, a partir de las muestras obtenidas de las necropsias se realizaran estudios histopatologicos mediante muestras de rutina y tincion con hematoxilina y eosina. Se observara la presencia de lesiones compatibles con enteritis viral y posteriormente se realizaran estudios inmunohistoquimicos para la identificacion de TGEV y Rotavirus A en cortes de intestino delgado. Finalmente se realizara el analisis de los datos obtenidos mediante una regresion lineal para evaluar la asociacion entre el porcentaje de animales positivos hallados a las pruebas implementadas y el cuadro clinico presente y se realizara una descripcion de la bioseguridad externa e interna de las granjas estudiadas.