木薯MeVINV1基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体构建及验证
Molecular Plant Breeding（2022）
Abstract
液泡转化酶(vacuolar invertase,VINV)是参与植物蔗糖代谢、器官发育的关键酶之一.木薯MeVINV1在块根发育及淀粉积累阶段的表达活跃,对该基因进行编辑敲除,将有助于解析MeVINVl在木薯块根淀粉积累过程中的作用.本研究构建了 MeVINV1的CRISPR/Cas9基因编辑载体,转化木薯脆性胚性愈伤组织以验证载体的编辑效果.结果发现:转化后的样品中,MeVINV1基因靶点位置出现测序多峰,而未转化样品中没有多峰出现,表明本研究构建的基因编辑载体可对MeVINV1基因进行编辑;检测分析潜在脱靶位点的序列,发现未出现脱靶现象.该研究为获得MeVINV1基因的突变体,明确其在木薯块根发育及淀粉积累过程中的功能奠定了基础.
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