扁果枸杞转录因子基因LbWIN1的克隆及响应非生物胁迫的表达分析

蜡质诱导因子 1(wax inducer 1/SHN1,WIN1/SHN1)与植物的抗逆性密切相关.为研究WIN1 在耐旱经济灌木扁果枸杞(Lycium barbarum ssp.Bianguo)中的功能及其应用前景,本研究用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从扁果枸杞中克隆了LbWIN1,构建了LbWIN1 融合增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的载体并表达在拟南芥(Arabidopsis thaliana)原生质体中进行亚细胞定位,用实时荧光定量PCR 法(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)分析 LbWIN1 的表达特征.结果表明,LbWIN1 基因长 1 103 bp,含 600 bp的开放阅读框,编码 199 个氨基酸,含有 1 个高度保守的 AP2 结构域.系统进化树分析发现,LbWIN1 蛋白与茄科番茄(Solanum lycopersicum)SlWIN1 和辣椒(Capsicum chinense)CcWIN1 的同源性高达 99%.亚细胞定位分析证明LbWIN1 蛋白定位于细胞核.LbWIN1 基因在叶、茎、根中均表达,其表达量受NaCl、渗透胁迫和外源脱落酸(ABA)诱导,表明LbWIN1 参与旱生植物响应盐和干旱等非生物胁迫.