牛、羊、猪、犬布鲁氏菌病多重PCR方法的建立

试验旨在建立一种快速检测牛、羊、猪、犬布鲁氏菌病的多重PCR方法。根据布鲁氏菌IS711拷贝数的差异和基因序列上的缺失序列设计4对引物，优化多重PCR反应体系和反应条件，分析了PCR的特异性、灵敏度、稳定性。建立的多重PCR方法对牛、羊、猪、犬布鲁氏菌均能扩增出预期片段，扩增片段大小分别为494、732、591、272 bp。牛、羊、猪、犬布鲁氏菌的灵敏度分别为1.1×10 2 、5.1×10 2 、3.5×10 2 、2.5×10 2 CFU/mL。初步应用该方法检测人工模拟的牛奶样品，灵敏度能达到1.0×10 3 CFU/mL。本试验建立的多重PCR检测方法简单、快速、灵敏度高，具有很好的应用前景，对牛、羊、猪、犬布鲁氏菌病的鉴定具有重要意义。