两种方法制备的水痘-带状疱疹病毒（Oka株）毒种感染2BS细胞的敏感性

目的用现有方法及新方法分别制备水痘-带状疱疹病毒（varicella-zoster virus,VZV）（Oka株）毒种,比较两种方法制备的毒种对2BS细胞的感染复数及増殖动态差异。方法用现有方法（用含2%小牛血清的病毒维持液于-70℃条件下冻存Oka株毒种）和新方法（用含90%小牛血清的病毒冻存液于-196℃条件下冻存Oka株毒种）制备第47代Oka株VZV毒种,采用不同的MOI（0.000 5、0.001、0.005、0.01、0.05、0.1）感染第37代2BS细胞,观察细胞病变（CPE）情况,收获不同MOI接种和培养不同时间点病毒制备疫苗,采用噬斑法检测疫苗原液、成品滴度以及37℃稳定性,确定两种方法制备的毒种对2BS细胞感染的最适MOI。结果现有方法制备毒种以0.01~0.1 MOI感染2BS细胞72 h后,病变达到高峰期;新方法制备毒种以0.001~0.01 MOI感染2BS细胞72 h后,病变达到高峰期。两种方法收获的病毒液制备的成品疫苗的病毒滴度为4.4~4.6 lg PFU/ml,37℃放置1周,病毒滴度3.8~4.0 lg PFU/ml;疫苗原液、成品滴度以及37℃稳定性无差异,均达到本公司水痘减毒活疫苗制造与检定规程制定的相关标准。结论现有方法和新方法制备的毒种最适MOI分别为0.01~0.1和0.001~0.01,新方法制备的毒种更适合水痘疫苗的生产。