Cu^2＋对MC3T3-E1细胞增殖分化影响及对OPG、MEPE表达的影响

目的观察Cu^2＋对小鼠成骨细胞（MC3T3-E1）增殖、分化以及OPG与MEPE表达。方法采用不同浓度1×10（-4～-6）mol/L Cu2＋作用于MC3T3-E1细胞,分别在24、48、72、96 h后采用MTT法检测Cu^2＋对细胞增殖的影响;ALP（碱性磷酸酶）试剂盒检测细胞培养液中ALP活性;RT-PCR方法检测1×10（-4～-6）mol/L Cu2＋作用下细胞中OPG和MEPE的mRNA表达水平,探讨MC3T3-E1细胞增殖分化的分子机制。结果作用48 h和96 h时,1×10-6mol/L Cu^2＋明显促进MC3T3-E1细胞增殖;作用24 h时,此浓度对细胞增殖无影响;作用72 h时,1×10-6mol/L Cu^2＋明显抑制细胞增殖;1×10-4mol/L、1×10-5mol/L的Cu2＋对MC3T3-E1细胞增殖无影响或抑制其增殖。ALP试剂盒检测1×10-6mol/LCu2＋在作用24 h时,对细胞分化无影响,其他时间均可促进细胞分化;1×10-4mol/L的Cu2＋抑制细胞分化,1×10-5mol/LCu2＋在作用96 h时,可显著促进MC3T3-E1细胞分化,其他时间对细胞分化无影响。琼脂糖凝胶电泳图片可见1×10（-4～-6）mol/LCu2＋作用于MC3T3-E1细胞48 h时,OPG和MEPEmRNA均有表达。实时荧光定量PCR结果表明,在Cu2＋浓度为1×10-6mol/L作用48 h时OPG与MEPEmRNA明显增加。结论作用48 h时,1×10-6mol/L Cu2＋可以促进MC3T3-E1细胞增殖和分化,其机制与OPG、MEPEmRNA相关。