ERK1/2对胆红素诱导的海马神经元损伤及NF-κB表达的影响

目的研究细胞外信号调节蛋白激酶（extracellular signal-regulated protein kinase,ERK）1/2对胆红素诱导的大鼠海马神经元核转录因子-κB（nuclear transcription factors,NF-κB）表达的影响,及其对抗胆红素神经元毒性的可能机制。方法将原代培养的海马神经元分为对照组、胆红素组、PD98059（MEK/ERK抑制剂）＋胆红素组及芥酸精（erucin,ERN,ERK激活剂）＋胆红素组。采用改良噻唑蓝比色法（MTT法）和Annexin V-FITC/PI双染色法,检测各组细胞相对存活率及凋亡率;免疫细胞化学法检测NF-κB p65蛋白表达。结果正常组、ERN＋胆红素组、胆红素组、PD98059＋胆红素组细胞相对存活率分别为100%、（80.020±8.552）%、（67.546±3.241）%、（50.591±3.981）%,各组比较有统计学差异（P〈0.01）。同一时间点各组NF-κB蛋白平均光密度（mean optical density,MOD）值均有统计学差异（P〈0.01）,对照组最低;胆红素组NF-κB蛋白MOD值在胆红素作用3 h（0.266±0.033）时较高,随时间延长逐渐下降,24 h（0.183±0.021）时最低（P〈0.01）;PD98059＋胆红素组NF-κB蛋白MOD值变化趋势同胆红素组,但MOD值明显下降（P〈0.05）;与胆红素组相反,ERN＋胆红素组MOD值在胆红素作用3 h（0.128±0.028）时较低,随时间延长逐渐升高,24 h（0.305±0.043）时最高（P〈0.01）。结论胆红素诱导海马神经元NF-κB表达具有时间依赖性;ERK1/2通路在胆红素诱导的海马神经元损伤过程中起保护作用,可能与ERK1/2通路抑制胆红素诱导的海马神经元NF-κB早期（3～6 h）表达、而促进其晚期（24 h）表达有关。