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LncRNA ZFAS1靶向miR-34b-5p调节弥漫大B细胞淋巴瘤细胞的增殖和凋亡

JIA Zhenwei, JIA Zhenheng, GUAN Jiangfeng, LI Yan

Journal of Medical Molecular Biology(2023)

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Abstract
目的 探究LncRNA ZFAS1 是否通过调节miR-34b-5p促进弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B lymphoma,DLBCL)细胞增殖并抑制细胞凋亡.方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测 30 例DLBCL患者肿瘤组织及DLBCL细胞株中LncRNA ZFAS1 和miR-34b-5p转录水平.将含有敲低ZFAS1 序列的载体和抑制或过表达miR-34b-5p的序列使用Lipofectamine 2000 试剂转染到SU-DHL-4 细胞,RT-qPCR检测敲低和过表达效率,双荧光素酶报告基因实验分析ZFAS1 和miR-34b-5p的靶向关系.最后SU-DHL-4 细胞随机分组为对照组、sh-ZFAS1 组、miR-34b-5p inhibitor组和shRNA-ZFAS1 +miR-34b-5p inhibitor组,克隆形成实验和流式细胞术分别检测细胞增殖和凋亡;蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白的表达.结果 在DLBCL患者和细胞系中ZFAS1 的表达量增加,而miR-34b-5p的表达量减少,同时ZFAS1 靶向负调节miR-34b-5p的表达.与对照组相比较,sh-ZFAS1 组miR-34b-5p的表达量增加,miR-34b-5p inhibitor组miR-34b-5p的表达量减少.与miR-34b-5p inhibitor组相比较,sh-ZFAS1 和miR-34b-5p inhibitor共转染组中miR-34b-5p的表达量增加.敲低ZFAS1 的表达抑制SU-DHL-4 细胞增殖,促进细胞凋亡,并降低线粒体膜电位,同时升高Bax/Bcl-2 和cleaved caspase-3/caspase-3 比值.结论 LncRNA ZFAS1 通过下调miR-34b-5p促进SU-DHL-4 细胞增殖并抑制细胞凋亡.
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Key words
LncRNA ZFAS1,miR-34b-5p,diffuse large B cell lymphoma,proliferation,apoptosis
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