miR-491-5p靶向FOLR1对乳腺癌细胞增殖及侵袭的影响

目的 探讨miR-491-5p对乳腺癌增殖及侵袭的影响及相关机制.方法 收集本科室30 例有明确病理诊断的新鲜乳腺癌及相对应的癌旁正常组织,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-491-5p及叶酸受体 1(folate-receptor 1,FOLR1)基因表达量.选取MCF-7 细胞,分为:control组、NC-mimics组、miR-491-5p mimics组、NC inhibitor组和miR-491-5p inhibitor组,克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell 实验检测细胞侵袭能力,Western blot 检测 AKT/mTOR信号通路 p-AKT、AKT、p-mTOR、mTOR蛋白表达情况.双荧光素酶实验检测分析miR-491-5p与FOLR1 间的靶向关系.选取MCF-7 细胞进行回复实验,分为NC inhibitor组、miR-491-5p inhibitor组、miR-491-5p inhibitor+si-NC组和miR-491-5p inhibitor+si-FOLR1 组,克隆形成实验及Transwell实验分别检测细胞增殖及侵袭变化,Western blot检测AKT/mTOR信号通路p-AKT、AKT、p-mTOR、mTOR蛋白表达情况.结果 与癌旁正常组织相比,癌组织中miR-491-5p的基因表达量明显降低(P＜0.05),FOLR1 基因表达量明显升高(P＜0.05).与control组及NC-mimics组相比,miR-491-5p mimics组细胞增殖及侵袭能力均降低(P＜0.05),p-AKT和p-mTOR蛋白表达量减少(P＜0.05);与control组及NC inhibitor组相比,miR-491-5p inhibitor组细胞增殖及侵袭能力均升高(P＜0.05),p-AKT和p-mTOR蛋白表达量增高(P＜0.05).双荧光素酶报告基因检测证明FOLR1 是miR-491-5p的靶标.回复实验表明,与miR-491-5p inhibitor组及miR-491-5p inhibitor+si-NC组相比,miR-491-5p inhibitor+si-FOLR1 组细胞增殖及侵袭能力明显降低(P＜0.05),p-AKT和p-mTOR蛋白表达量显著减少(P＜0.05).结论 miR-491-5p靶向FOLR1 抑制乳腺癌细胞增殖及侵袭,可能与改变AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达具有一定相关性.