狂犬病疫苗效价测定改良NIH法建立及应用

目的 按照动物试验3R原则,建立改良NIH法(modified NIH,M-NIH)即单一稀释法检测狂犬病疫苗效价,替代传统的NIH法.方法 通过比较单一稀释度的待检疫苗与第八批狂犬病疫苗效力试验用国家标准品的小鼠保护率,建立狂犬病疫苗效价测定的改良NIH法,并对该方法进行重复性、准确性及适用性验证.采用M-NIH法和NIH法对52 批狂犬病疫苗进行比较研究,再联合9 家实验室验证共计247 批次,使用Kappa系数和Mcnemar-Bowker检验评价两种方法的一致性.并采用 3 家企业生产的狂犬病疫苗,进行适用性验证.对M-NIH法获批准后近 4 年来应用于狂犬病疫苗批签发检验做回顾性分析.结果 52 批次狂犬病疫苗效价测定的两种方法比较研究结果显示,两种方法的符合率为 92.3％(Kappa=0.82,P<0.01);247 批次扩大验证结果表明两种方法的符合率为80.2％(Kappa=0.54,P<0.01).采用M-NIH法测定标准品保护率时,实验室内变异系数为21.7％,实验室间变异系数为 23.4％.3 家企业批签发狂犬病疫苗适用性验证结果表明 M-NIH 重复性检测结果与 NIH 结果符合率为100％.近4 年来批签发机构采用M-NIH法抽检820 批狂犬病疫苗效价,合格率为93.8％;M-NIH不合格批次最终经NIH法测定后,合格率合计为 99.8％.结论 建立了改良NIH法.该方法获得批准后用于狂犬病疫苗的效价检测,大大减少了动物使用量,提高了狂犬病疫苗的批签发效率.