基于miR-155/BDNF/TrkB轴探讨西红花酸对急性心力衰竭大鼠心功能及心室重构的影响

目的:观察西红花酸对急性心力衰竭大鼠心功能及心室重构的影响,并探讨可能的机制.方法:取 45 只 SD大鼠,随机选取10只设置为 Sham组;其余大鼠建立急性心力衰竭模型,随机分为急性心力衰竭组、Crocetin组、Crocetin联合转染组,剔除建模失败及后续实验死亡的大鼠后,每组均纳入 10只.Crocetin联合转染组左心腔内注射 100 μL微小RNA(miR)-155激活剂腺病毒(5×1012 μg/mL)后腹腔注射西红花酸 100 mg/kg,Crocetin组腹腔注射西红花酸 100 mg/kg,Sham组、急性心力衰竭组腹腔注射等量二甲基亚砜(DSMO),每日 1次,持续 2周.检测心功能指标及心室重构指标;逆转录实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测心肌组织miR-155表达量;双荧光素酶实验验证 miR-155与 BDNF的靶向关系;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测心肌组织脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸激酶受体 B(TrkB)、磷酸化-TrkB(p-TrkB)蛋白表达.结果:与 Sham组比较,急性心力衰竭组左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)降低,左室后壁厚度(LVPW)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)增加(P<0.05);与急性心力衰竭组比较,Crocetin组 LVEF、LVFS升高,LVPW、LVEDD、LVESD降低(P<0.05);与 Crocetin组比较,Crocetin联合转染组 LVEF、LVFS降低,LVPW、LVEDD、LVESD增加(P<0.05).与 Sham组比较,急性心力衰竭组 miR-155表达量升高(P<0.05);与急性心力衰竭组比较,Crocetin组 miR-155表达量降低(P<0.05);与Crocetin组比较,Crocetin联合转染组miR-155表达量升高(P<0.05).双荧光素酶结果显示,BDNF是 miR-155的一个靶基因,两者结合位点是 BDNF的 3'-UTR片段.与 Sham组比较,急性心力衰竭组 BDNF蛋白表达、p-TrkB/TrkB降低(P<0.05);与急性心力衰竭组比较,Crocetin组BDNF蛋白表达、p-TrkB/TrkB 升高(P<0.05);与 Crocetin组比较,Crocetin联合转染组 BDNF蛋白表达、p-TrkB/TrkB降低(P<0.05).结论:西红花酸可抑制急性心力衰竭大鼠心室重构,提高心功能,可能与调控 miR-155靶向调控 BDNF/TrkB轴有关.