钙蛋白酶2通过诱导三阴乳腺癌细胞上皮间质转化抵抗紫杉醇的机制探讨
Tianjin Medical Journal(2023)
Abstract
目的 观察钙蛋白酶2(Calpain-2)在三阴乳腺癌细胞抵抗紫杉醇(PTX)中的作用及机制.方法 人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞转染Calpain-2质粒及相应空载体,设为过表达组和空载体组,同时以未转染细胞作为空白组.MTT法检测PTX对各组细胞存活率的影响;免疫荧光实验检测YAP的分布情况;蛋白质免疫印迹实验检测Calpain-2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、磷酸化大肿瘤抑制基因1(p-LATS1)及磷酸化yes相关蛋白(p-YAP)表达.在过表达Calpain-2的基础上加用YAP抑制剂XMU-MP-1进行干预,观察YAP对PTX抵抗的介导作用.结果 与空载体组相比,PTX处理后过表达组细胞存活率增加,半数抑制浓度(IC50)升高(P<0.05).与空载体组相比,过表达组细胞N-cadherin和Vimentin蛋白表达上调,E-cadherin蛋白表达下调(P<0.05),p-LATS1和p-YAP蛋白表达上调(P<0.01),YAP在细胞核内分布减少.与过表达组相比,XMU-MP-1+过表达组N-cadherin和Vimentin蛋白表达下调,E-cadherin蛋白表达上调(P<0.01).PTX处理后,与过表达组相比,XMU-MP-1+过表达组细胞存活率减少,IC50降低(P<0.01).结论 Calpain-2通过YAP诱导三阴乳腺癌细胞上皮间质转化,从而对PTX产生药物抵抗.
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triple negative breast neoplasms,epithelial-mesenchymal transition,drug resistance,neoplasm,taxol,calpain 2
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