ACSL4抑制剂对草酸钙结石致小鼠肾损伤及间质纤维化的影响

目的 探讨ACSL4抑制剂调控铁死亡在草酸钙结石所致小鼠肾损伤及间质纤维化中的肾保护作用及可能机制.方法 15只雄性C57BL/6小鼠随机分为模型组、ACSL4抑制剂组、对照组各5只,其中模型组腹腔注射乙醛酸水溶液(100 mg/kg)构建草酸钙肾结石小鼠模型,ACSL4抑制剂组腹腔注射乙醛酸水溶液(100 mg/kg)并饮用含Abemaciclib(30 mg/kg)无菌水,对照组腹腔注射等量生理盐水,3组小鼠均连续处理12 d.12 d后检测3组小鼠血清肌酐、尿素水平.取3组小鼠左侧肾脏组织,行组织病理检查Von-Kossa染色、HE染色、Masson染色,观察肾脏晶体沉积、组织损伤及间质纤维化情况;行免疫组织化学检查,观察肾组织ACSL4、α-SMA表达情况;采用Western blot法检测肾组织ACSL4、collagen Ⅰ、vimentin、α-SMA、SLC7A11、GPX4 蛋白相对表达量.结果 (1)模型组血清肌酐[(68.91± 14.18)μmol/L]、尿素[(7.49±1.92)mmol/L]水平均高于对照组[(30.22±6.80)μmol/L、(3.76±0.38)mmol/L]、ACSL4 抑制剂组[(44.10±4.42)μmol/L、(4.61±0.76)mmol/L](P＜0.05),ACSL4 抑制剂组均高于对照组(P＜0.05).(2)对照组肾组织未见草酸钙晶体沉积,肾组织结构基本正常,未见明显炎症细胞浸润及胶原纤维沉积;模型组肾组织大量黑色草酸钙晶体沉积,肾小管上皮细胞肿胀、脱落,细胞核染色质浓缩,管腔扩张、变形,周围炎症细胞浸润,肾间质胶原纤维大量沉积;与模型组相比,ACSL4抑制剂组肾组织草酸钙晶体沉积减少,肾小管上皮细胞肿胀减轻,周围炎症细胞浸润减少,肾间质胶原沉积减少,纤维化程度减轻.(3)对照组肾组织ACSL4和α-SMA呈弱阳性表达;模型组肾组织ACSL4和α-SMA阳性表达较对照组明显增多;ACSL4抑制剂组肾组织ACSL4和α-SMA阳性表达较模型组明显减少.(4)模型组肾组织 ACSL4、collagen Ⅰ、vimentin、α-SMA 蛋白相对表达量(0.93±0.01、1.19±0.06、1.19± 0.08、1.20±0.08)均高于对照组(0.33±0.01、0.53±0.06、0.38±0.04、0.29±0.03)、ACSL4 抑制剂组(0.62±0.04、0.78±0.04、0.70±0.06、0.68±0.02)(P＜0.05),ACSL4抑制剂组均高于对照组(P＜0.05);模型组肾组织 SLC7A11、GPX4 蛋白相对表达量(0.56±0.01、0.39±0.01)均低于对照组(0.92±0.02、0.91±0.01)、ACSL4 抑制剂组(0.77± 0.05、0.74±0.02)(P＜0.05),ACSL4抑制剂组均低于对照组(P＜0.05).结论 ACSL4抑制剂通过下调ACSL4表达,抑制铁死亡,从而减轻草酸钙结石导致的小鼠肾损伤和间质纤维化.