野鸢尾苷的制备及其体外抗炎活性机制的初探

目的 从中药射干中分离制备野鸢尾苷单体,并初步研其体外抗炎活性及作用机制.方法 采用多溶剂萃取法制备野鸢尾苷;在野鸢尾苷溶液对小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7无细胞毒性的浓度范围内,采用脂多糖诱导并建立体外细胞炎症模型,给予不同浓度野鸢尾苷溶液干预,采用Griess法检测细胞上清液中一氧化氮(NO)的含量、ELISA法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的含量;并结合野鸢尾苷对乙酰胆碱酯酶活性的影响,初步揭示野鸢尾苷的抗炎活性及作用机制.结果 多溶剂萃取法所得的野鸢尾苷单体,经HPLC峰面积归一化法计算其纯度大于98％;给药12.5-100 μg·mL-1野鸢尾苷对RAW 264.7无细胞毒性;与模型组比较,在给药12.5～100 μg·mL-1野鸢尾苷时,对抑制巨噬细胞中TNF-α、NO、IL-1β、IL-6的释放具有极显著性差异,且呈剂量关系;野鸢尾苷对乙酰胆碱酯酶的活性具有抑制作用,其数半抑制浓度(IC50)为4.09 mg·mL-1,且呈剂量关系.结论 多溶剂萃取法是一种简单、高效分离制备射干中野鸢尾苷的方法;野鸢尾苷的抗炎机制可能是通过胆碱能抗炎通路,调节巨噬细胞释放TNF-α、IL-1β、IL-6炎性介质,并结合调节NO抗炎途径,从而实现多途径的抗炎作用.