槲皮素对钛颗粒诱导的成骨细胞凋亡抑制作用研究

目的 探讨槲皮素对钛颗粒诱导的成骨细胞凋亡的抑制作用.方法 采用钛颗粒处理小鼠MC3T3-E1 细胞系构建细胞凋亡模型,应用槲皮素进行干预并设置对照,噻唑蓝法[3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT法]法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunoadsordent assay,ELISA)检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达,免疫荧光技术检测C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)、B细胞淋巴瘤因子 2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白的表达,实时定量聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测CHOP和Bcl-2 的mRNA的表达.结果 钛颗粒抑制成骨细胞增殖活性,并呈浓度依赖性.流式细胞术检测结果显示,钛颗粒诱导成骨细胞凋亡.槲皮素预培养能有效缓解钛颗粒对成骨细胞增殖活性的抑制,减少其凋亡.ELISA检测结果显示,槲皮素能减少IL-1β和TNF-α表达.免疫荧光技术显示槲皮素参与调控CHOP蛋白和Bcl-2 蛋白的表达,RT-PCR检测结果显示,槲皮素参与调控CHOP和Bcl-2 的mRNA的表达.结论 槲皮素能抑制钛颗粒诱导的成骨细胞凋亡,其作用机制可能与内质网应激启动的凋亡途径抑制,调控CHOP、Bcl-2 蛋白表达的信号通路有关.