基于网络药理学的余甘子有效部位调控巨噬细胞极化机制研究

目的 筛选余甘子鞣质调控巨噬细胞极化的活性部位,探讨其调控巨噬细胞极化的主要化学成分和作用机制.方法 采用CCK-8细胞增殖实验检测细胞活力;荧光定量PCR(qPCR)检测M2巨噬细胞标志物Arg-1、CD206、TNF-αmRNA表达水平以筛选有效部位;UPLC-Q-Exactive-MS/MS 表征其化学成分.利用 SwissADME 和 SwissTargetPrediction数据库筛选活性成分并获取其对应靶点,与GEO数据库中筛选的M1-M2型巨噬细胞差异基因取交集,运用Cytoscape3.7.2软件绘制"药物成分-潜在靶点"网络图,并在STRING数据库进行蛋白互作关系分析,并进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析.结果 基于体外巨噬细胞极化模型,发现余甘子鞣质20％甲醇洗脱部位可显著抑制M2巨噬细胞标志物Arg-1和CD206mRNA的表达,升高M1巨噬细胞标志物TNF-αmRNA的表达(P＜0.001),且活性明显强于其他洗脱部位.通过比对余甘子糅质与20％甲醇洗脱部位UPLC-MS总离子流图,鉴定出20％甲醇洗脱部位中化学成分29个,筛选出有效成分11个,对应靶点94个,药物-巨噬细胞相关交集靶点37个;KEGG富集分析结果显示,余甘子糅质20％甲醇洗脱部位调控巨噬细胞极化相关靶点主要为HIF-1信号通路、PI3K-Akt信号通路、NF-kappaB信号通路等,涉及有机物的反应、对含氧化合物的反应、对化学刺激的细胞反应等显著相关生物过程.结论 本研究基于巨噬细胞极化模型筛选出余甘子鞣质中调控巨噬细胞极化的主要活性部位,借助网络药理学初步证明了余甘子鞣质20％甲醇洗脱部位可以多成分、多靶点、多通路共同调控巨噬细胞极化,为进一步阐明余甘子鞣质调控巨噬细胞极化的药效物质和作用机制提供依据.