LncRNA MEG3对过氧化氢诱导人晶状体上皮细胞焦亡的机制研究
Sichuan Medical Journal(2023)
Abstract
目的 探讨LncRNA MEG3 对过氧化氢诱导人晶状体上皮细胞焦亡的影响.方法 利用CCK-8 检测不同浓度下H2O2培养人晶状体上皮细胞活力确定最适浓度.流式细胞术检测在最适浓度下细胞焦亡率、Western-Blot检测caspase-1 的表达,qRT-PCR检测LncRNA MEG3 的相对表达量.转染HLE-B 3细胞沉默LncRNA MEG3,将HLE-B 3 细胞随机分为空白对照组、siNC组、siMEG3 组,CCK-8 和流式细胞术分别检测各组细胞活力和焦亡率,Western-Blot检测焦亡相关蛋白caspase-1、N-GSDMD、NLRP3 的表达水平,ELISA检测IL-1 b的浓度.结果 CCK-8 结果显示HLE-B 3 细胞活力随H2O2浓度上升而下降,最适浓度下人晶状体上皮细胞焦亡率上升、LncRNA MEG3、caspase-1 表达上升,差异均有统计学意义(P<0.05).敲低MEG3 表达后,与对照组相比细胞焦亡率上升,caspase-1、NLRP3、N-GSDMD蛋白表达下调,IL-1 b分泌量减少,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 LncRNA MEG3 通过Caspase-1 介导的焦亡经典途径参与H2O2 诱导人晶状体上皮细胞焦亡过程,敲低MEG3 可以抑制人晶状体上皮细胞焦亡.
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lens epithelial cells,age-related cataract,LncRNA MEG3,pyroptosis
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