叉头框M1调控circ_NOTCH1对胃癌细胞增殖、侵袭及耐药性的影响

目的 探讨叉头框M1(FOXM1)调控环状RNA circ_NOTCH1对胃癌细胞增殖、侵袭及耐药性的影响.方法 采用Western blot、实时荧光定量PCR分别检测胃癌及癌旁组织、人正常胃黏膜上皮细胞GES-1 及胃癌细胞系MGC-803、HGC-27、BGC-823 中FOXM1 蛋白及circ_NOTCH1 表达.将BGC-823 细胞分为对照组、短发夹RNA FOXM1(sh-FOXM1)及阴性对照(sh-NC)组、小干扰RNA circ_NOTCH1(si-circ_NOTCH1)及阴性对照(si-NC)组、sh-FOXM1 +circ_NOTCH1过表达质粒(sh-FOXM1 +pcDNA-circ_NOTCH1)及sh-FOXM1 +阴性对照(sh-FOXM1 +pcDNA)组,采用CCK-8 法和平板克隆形成实验检测细胞增殖,Transwell检测细胞侵袭.各组细胞分别加入1.0 mg/L阿霉素处理48h后分析细胞耐药性,Western blot检测FOXM1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bax、多药耐药相关蛋白1(MRP1)、多药耐药基因1(MDR1)的表达,RNA下拉和RNA免疫沉淀检测FOXM1 蛋白与circ_NOTCH1 结合情况.结果 与癌旁组织比较,胃癌组织FOXM1 蛋白、circ_NOTCH1 表达水平显著升高(P均<0.001);与GES-1 细胞比较,MGC-803、HGC-27、BGC-823 细胞FOXM1 蛋白、circ_NOTCH1 表达水平显著升高(P均<0.001).与对照组和sh-NC组比较,sh-FOXM1 组BGC-823 细胞FOXM1 蛋白、circ_NOTCH1、吸光度值、克隆形成率、细胞侵袭数量、细胞活力及PCNA、MRP1、MDR1 蛋白表达显著降低,Bax蛋白表达显著升高(P均<0.001);与对照组和si-NC组比较,si-circ_NOTCH1 组BGC-823 细胞circ_NOTCH1、吸光度值、克隆形成率、细胞侵袭数量、细胞活力及PCNA、MRP1、MDR1 蛋白表达显著降低,Bax蛋白表达显著升高(P均<0.001).与sh-FOXM1 组和sh-FOXM1 +pcDNA组比较,sh-FOXM1 +pcDNA-circ_NOTCH1 组BGC-823 细胞circ_NOTCH1、吸光度值、克隆形成率、细胞侵袭数量、细胞活力及PCNA、MRP1、MDR1 蛋白表达显著升高,Bax蛋白表达显著降低(P均<0.001).FOXM1 蛋白可与circ_NOTCH1 相互作用.结论 干扰FOXM1 可能通过下调circ_NOTCH1 表达抑制胃癌细胞增殖、侵袭及耐药性.