EZH2通过ROS/p38 MAPK磷酸化途径调控非小细胞肺癌细胞生长及细胞因子的表达

目的:探究Zeste同源物2 增强子(EZH2)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞生长和细胞因子表达的影响及机制.方法:免疫组化染色观察NSCLC组织及肿瘤边缘正常组织内EZH2 蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)测定人NSCLC细胞系与正常肺上皮细胞系内EZH2 mRNA表达.将A549 细胞分为对照组、GSK126 组、ROS抑制剂(NAC)+GSK126 组、SB203580 +GSK126 组,进行相应处理后,MTT法、EdU染色及细胞克隆形成实验检测各组细胞增殖情况,酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组细胞培养液上清血管内皮生长因子(VEGF)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,DCFH-DA荧光探针法检测各组细胞内活性氧(ROS)水平,蛋白质免疫印迹(Western blot)实验测定各组细胞内p38 丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)磷酸化水平.结果:NSCLC组织内EZH2 阳性表达率显著高于肿瘤边缘正常组织(P<0.05),人NSCLC细胞系A549、HCC827、H1975、H1299、SPC-A-1 中EZH2 mRNA相对表达量显著高于正常肺上皮细胞系BEAS-2B(P<0.05).与对照组比较,GSK126 组细胞存活率、EdU阳性率显著降低(P<0.05),细胞克隆形成数目显著减少(P<0.05),细胞培养液上清中免疫因子VEGF、IFN-γ、TNF-α含量均显著减少(P<0.05),而细胞内ROS水平及p38 MAPK磷酸化水平均显著升高(P<0.05).与GSK126 组比较,NAC +GSK126 组和SB203580 +GSK126 组细胞存活率、EdU阳性率显著升高(P<0.05),细胞克隆形成数目显著增加(P<0.05),细胞培养液上清中VEGF、IFN-γ、TNF-α含量均显著增加(P<0.05),同时,细胞内ROS水平、p38 MAPK磷酸化水平均显著下降(P<0.05).结论:EZH2 在NSCLC中高表达,并可促进肿瘤细胞生长与VEGF、IFN-γ、TNF-α分泌,该作用机制可能与调控ROS/p38 MAPK磷酸化途径有关.