山银花茎叶与花化学成分和抗炎活性比较研究

目的 比较山银花茎叶和花提取物的主要成分及抗炎活性差异.方法 通过D101大孔树脂制备富含酚酸与三萜类成分的山银花茎叶及花提取部位,采用HPLC测定样品中6种酚酸和3种三萜含量.利用脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导RAW264.7细胞炎症模型,将细胞分为空白对照组、模型组、地塞米松组(32 μg·mL-1)、山银花茎叶组(25、50、100、200 μg·mL-1)、山银花组(29.5、59、118、236 μg·mL-1),共5组.空白对照组和模型组给予等量的无血清培养基,其余组以含各药物的无血清培养基预处理2h后,加入浓度为1μg·mL-1 的LPS,继续培养24 h.采用Griess法检测一氧化氮(nitric oxide,NO)释放量.将小鼠随机分为空白对照组、模型组、地塞米松组(5mg·kg-1)、山银花茎叶组(1.25、2.5、5g·kg-1)和山银花组(1.25、2.5、5g·kg-1),连续灌胃给药7d后,除空白对照组外,其余各组小鼠于右耳内外侧涂抹巴豆油(40 μL)建立耳郭肿胀模型和左侧足趾皮下注射1%角叉菜胶(30 μL)建立足趾肿胀模型.4h后,测定各组小鼠耳郭和足趾肿胀度,计算肿胀抑制率,采用ELISA法测定小鼠足肿胀组织中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis facor-α,TNF-α)和前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的含量.结果 山银花茎叶中总酚酸(P＜0.01)和隐绿原酸(P＜0.05)含量高于山银花,总三萜(P＜0.01)、灰毡毛忍冬皂苷乙(P＜0.01)、灰毡毛忍冬皂苷甲(P＜0.05)含量低于山银花.与空白对照组比较,模型组RAW264.7 细胞NO水平、小鼠耳郭肿胀度和足趾肿胀度以及足肿胀组织中炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、PGE2)水平均显著升高(P＜0.01).与模型组比较,山银花茎叶组(50、100、200 μg·mL-1)和山银花组(59、118、236 μg·mL-1)RAW264.7细胞NO水平降低(P＜0.01);山银花茎叶组(1.25、2.5、5g·kg-1)和山银花组(1.25、2.5、5g·kg-1)耳郭肿胀度明显降低(P＜0.01),耳肿胀抑制率升高(P＜0.01);山银花茎叶组(2.5、5g·kg-1)和山银花组(2.5、5g·kg-1)足趾肿胀度降低(P＜0.01),足肿胀抑制率升高(P＜0.01);山银花茎叶组(1.25、2.5、5g·kg-1)和山银花组(1.25、2.5、5g·kg-1)足肿胀组织中IL-1β、IL-6、TNF-α和PGE2的含量降低(P＜0.01).结论 山银花茎叶和花具有相似的酚酸和三萜成分,但其含量存在显著差异.山银花茎叶和花提取物对急性炎症均有明显抑制作用,其机制可能与抑制外周TNF-α、IL-6、IL-1β、PGE2和NO炎症因子的表达有关.