Busca de doadores com expressão negativa para cd38 em eritrócitos para elaboração de triagem sorológica de anticorpos irregulares de pacientes em uso de daratumumabe

Introdução: A glicoproteína CD38 é uma proteína multifuncional que possui função enzimática e de receptor celular sendo expressa em tecidos linfoides e não linfoides. Nos eritrócitos, esta proteína apresenta níveis de expressões variáveis, somente não é expresso nos eritrócitos de cordão umbilical e no fenótipo raro do sistema sanguíneo Lutheran (Lua- e Lub-). A administração do anticorpo monoclonal humano IgG1 kappa anti-CD38 (Daratumumabe) é atualmente tratamento de resgate e, em alguns casos, de primeira linha para o Mieloma Múltiplo (MM). O Anti-CD38 se liga aos sítios de CD38 nos eritrócitos e observa-se pan-aglutinação na pesquisa e identificação de anticorpos irregulares (PAI e IAI). Ainda que o tratamento dos eritrócitos-teste com o químico ditiotreitol (DTT) consiga eliminar esta interferência, ele resulta em desnaturação de antígenos dos sistemas Kell, Dombrock e Lutheran, podendo comprometer a segurança transfusional. Objetivo: 1) Identificar doadores com expressão negativa para CD38 quando da testagem por método sorológico pela técnica de gel teste. 2) Propor reagentes que possam ser utilizados na PAI e IAI para pacientes com MM em uso de anti-CD38. Metodologia: No período de jun/2021 a dez/2021 foram recrutados 800 doadores de repetição com o tipo sanguíneo O para o estudo. O anti-CD38 foi diluído com solução fisiológica nas concentrações: 1:100, 1:1000 e 1:3000. As hemácias dos doadores foram lavadas 3 vezes com solução fisiológica e diluídos em suspensão de 0,8% em diluente DGSol (Grifols, Spain). Foram adicionados 50 uL da suspensão da hemácia e 25 uL do anti-CD38 diluído 1:3000 em cartões de gel Liss/Coombs, seguido por incubação de 15 minutos a 37°C e centrifugação. As amostras dos doadores que apresentaram ausência de aglutinação foram submetidas ao ensaio de expressão de CD38 por citometria de fluxo, para a comparação com expressão antigênica com amostras de cordão umbilical. Resultados: Dos 800 doadores testados, 51% foram mulheres e 49% homens. Em relação as aglutinações com o anti-CD38, 81% (n = 646) apresentaram intensidade de 2+, 8,2% (n = 67) intensidade 1+, 5,5% (n = 44) intensidade fraca (W) e 5,3% (n = 43) ausência de aglutinação (negativo). Os doadores que apresentaram resultado negativo foram testados com concentrações maiores de anti-CD38 (1:1000) e 40 (de 43) apresentaram intensidade fraca de aglutinação, enquanto 3 mantiveram resultado negativo, o qual se manteve com testagem com anti-CD38 puro. Estas 3 amostras de doadores foram submetidas ao ensaio por citometria de fluxo que demonstrou expressão de CD38 equivalente à de recém-nascidos. Conclusão: A frequência de expressão CD38 negativa em gel-teste dentre os doadores de sangue foi de 0,38%. Isso permitiria criopreservação de eritrócitos de diferentes fenótipos para realização de prova cruzada com amostras de pacientes em uso de Daratumumabe (após a PAI tratados com DTT), visando garantir compatibilidade direcionados a antígenos eritrocitários desnaturados pelo químico ditiotreitol.