粗毛纤孔菌多糖提取工艺优化及体外抗炎作用

通过单因素实验和响应面实验优化粗毛纤孔菌(Inonotus hispidus)多糖提取工艺,纯化获得均一多糖(INP);采用ELISA法测定NO和细胞因子IL-6、TNF-α含量,采用RT-PCR方法测定炎症相关基因表达量,采用蛋白免疫印迹方法检测p38MAPK/NF-κB、AKT信号通路相关蛋白表达量,研究INP(低、中、高剂量分别为125、250、500μg·mL-1)对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW 264.7炎症的影响.结果表明:多糖提取工艺为料液比1∶18(g∶mL)、提取温度80.5℃、提取时间1.9 h,在此条件下多糖得率为(0.612±0.057)％.与模型组相比,INP中剂量组的NO、TNF-α含量显著降低,高剂量组非常显著降低;高剂量组的IL-6含量显著降低.INP中、高剂量组的IL-1β表达量均非常显著降低,高剂量组的TNF-α表达量非常显著降低,高剂量组的IL-6表达量显著降低.INP中、高剂量组的p-p38表达量分别非常、极显著降低,高剂量组的p-Jnk1/2表达量极显著降低,低、高剂量组的p-Erk1/2表达量均极显著降低,高剂量组的p-p65表达量非常显著降低,中、高剂量组的IκBα表达量均非常显著降低,低、中、高剂量组的p-AKT表达量均极显著降低.研究结果表明INP可减轻LPS诱导的细胞炎症损伤,将为粗毛纤孔菌多糖进一步开发利用提供参考.