可溶性CD83促进耐受性DCs和Treg细胞增殖和免疫耐受的分子机制
Acta Universitatis Medicinalis Anhui(2023)
Abstract
目的 探索可溶性CD83(sCD83)发挥免疫抑制活性的分子机制.方法 分离6~8周龄C57B/6小鼠骨髓祖细胞培养骨髓衍生树突细胞(DCs)和脾脏内CD4+T细胞.分别向细胞培养物中加入10μl PBS处理(Control组)或10μl 10μg/ml的可溶性CD83处理(sCD83组).流式细胞术测定DCs中的非成熟DCs(imDCs)和CD4+T细胞中的CD4+CD25+FOXP3+T细胞,即调节性T(Treg)细胞的细胞计数所占百分比.Western blot测定imDCs胞内吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的表达水平及Treg细胞内磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(Akt)、细胞核和细胞质核因子-κB亚基RelB和程序性细胞死亡蛋白-1(PD-1)的表达水平.ELISA测定DCs培养上清液中犬尿酸的水平以及imDCs和CD4+T细胞共培养系统中白细胞介素(IL)-10、转化生长因子-β(TGF-β)和IL-12的水平.结果 与Control组相比,sCD83组表达表面标志物CD40、CD83、CD86、Ⅱ类主要组织相容性复合物(MHC Ⅱ)的DCs细胞计数所占百分比降低(P<0.05);DCs培养上清液中犬尿酸的水平上升(P<0.05).与Control组相比,sCD83组Treg细胞计数所占百分比升高(P<0.05);胞内PTEN和细胞质RelB的表达增强(P<0.05),而p-Akt、细胞核RelB和PD-1的表达降低(P<0.05);Akt的表达水平差异无统计学意义.在imDCs与CD4+T细胞共培养物上清液中,与Control组相比,sCD83组IL-10和TGF-β 的水平升高(P<0.05),IL-12的水平降低(P<0.05).结论 sCD83能够抑制CD4+T细胞核内RelB的水平调节相关细胞因子的分泌,影响DCs和Treg细胞的细胞间通讯,促进耐受性imDCs和Treg细胞的增殖.
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immunosuppressive agent,soluble CD83,tolerant DCs,Treg cells,RelB,indoleamine 2,3-dioxygenase
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