犬乳腺肿瘤他莫昔芬耐药细胞中差异表达circRNAs的筛选与分析

[目的]筛选和分析环状RNA(circRNA)在犬乳腺肿瘤(CMGT)耐药中的作用,为肿瘤诊断和治疗提供新靶点.[方法]以CMGT细胞CHMm作为研究对象,首先通过浓度梯度法和浓度维持法构建CMGT他莫昔芬(TAM)耐药细胞系,然后采用CCK-8法检测CMGT细胞对TAM的敏感性,最后通过高通量测序技术筛选耐药细胞中差异表达的circRNAs,通过GO功能和KEGG信号通路分析其可能参与的生物过程.[结果]经过TAM持续刺激,CHMm形态变为长梭形,半数抑制浓度(IC50)由4.07提高至13.75 μmol/L,说明耐药细胞展现更强TAM抗性.测序结果显示,耐药细胞中差异表达的circRNAs 46个,GO功能分析涉及肿瘤细胞外基质、蛋白质类泛素化、细胞黏附和细胞迁移等过程,主要信号通路为Notch、Rap1、ErbB、Fox()和P13K等通路.[结论]本研究成功构建犬乳腺肿瘤TAM耐药细胞系CHMmTAM,耐药细胞展现更强的增殖能力和TAM抗性.高通量筛选了亲本和耐药细胞中差异表达的circRNAs,耐药性产生可能通过Notch、Rap1和ErbB通路影响细胞信号转导、细胞泛素化、细胞转移等生物学过程,最终参与肿瘤耐药.