猪δ冠状病毒E蛋白的原核表达

猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)是近年来新发的一种猪肠道冠状病毒,具有跨物种传播的能力,严重威胁人类和动物健康.为了解PDCoV的致病机制、建立快速检测方法,对PDCoV E蛋白进行原核表达.以PDCoV HNZK-04 毒株为模板设计PDCoV E基因的特异性引物,扩增目的基因并克隆至原核表达载体pET-32a中,构建重组表达质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达,并对E蛋白的抗原性进行鉴定.结果显示,成功克隆了大小为252 bp的E基因,构建了重组表达载体pET-32a-PDCoV-E.SDS-PAGE结果表明,成功表达了大小约为30 kDa的重组E蛋白,western blot显示目的蛋白具有良好的反应原性.综上所述,成功构建了PDCoV E蛋白重组质粒并表达了目的蛋白,且重组蛋白具有良好的反应原性,可为PDCoV诊断方法的建立以及进一步研究E蛋白的功能奠定了基础.