芍药甘草汤通过调控PI3K/Akt/mTOR通路对帕金森病大鼠多巴胺能神经元自噬的影响

目的 研究芍药甘草汤对帕金森病大鼠脑黑质多巴胺能神经元自噬水平的调控作用及机制.方法 随机选取20只大鼠采用左侧纹状体两点注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)制备帕金森病模型;假手术组注射等量生理盐水.将造模成功的18只帕金森病大鼠随机分为模型组和芍药甘草汤组(12g/kg),每组9只,连续灌胃给药28 d后,注射阿扑吗啡(APO)观察大鼠的旋转行为.大鼠安乐死后取脑黑质区,透射电镜观察自噬小体,Western blot法检测Beclin1、Lamp2、PI3K p85α、Akt1、p-Akt、mTOR、p-mTOR 和 LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ 蛋白表达,免疫组化检测 Beclin1、LC3-Ⅱ、p-Akt和p-mTOR阳性表达.结果 正常组和假手术组大鼠均未出现有效的旋转行为,模型组的转速为9.7 r/min,芍药甘草汤组大鼠的转速低于模型组(P＜0.01),为4.3r/min.与假手术组比较,模型组黑质区多巴胺能神经元内自噬小体数量减少(P＜0.01),Beclin1和Lamp2蛋白表达以及LC3Ⅰ向LC3Ⅱ的转化均降低(P＜0.01),且PI3Kp85α、p-Akt1和p-mTOR蛋白表达均升高(P＜0.01).与模型组比较,芍药甘草汤组黑质区多巴胺能神经元内自噬小体数量增多(P＜0.01),Beclin1和Lamp2蛋白表达以及LC3 Ⅰ向LC3 Ⅱ的转化均升高(P＜0.01),且PI3K p85α、p-Akt1和p-mTOR蛋白表达均降低(P＜0.01).结论 芍药甘草汤能增强6-OHDA诱导的帕金森病大鼠脑黑质多巴胺能神经元的自噬能力,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR通路有关.