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CircCPA4调节miR-377-3p/GGA3轴对肺癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响

JIN Man, WANG Tonghui,REN Xiaofei, 李淼

Hebei Medical Journal(2023)

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摘要
目的 探讨CircCPA4 调节miR-377-3p/GGA3 轴对肺癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响.方法 qRT-PCR、Western blot分别检测肺癌组织、相邻正常组织、人肺癌A549 细胞、人正常肺上皮细胞BEAS-2B中CircCPA4、miR-377-3p、GGA3 表达;将A549 细胞分为NC组(未做任何处理)、si-NC组(转染si-NC)、si-CircCPA4 组(转染si-CircCPA4)、si-CircCPA4+inhibitor NC组(转染si-CircCPA4+inhibitor NC)、si-CircCPA4+miR-377-3p inhibitor组(转染si-CircCPA4+miR-377-3p inhibitor).双荧光素酶报告基因实验检测CircCPA4、miR-377-3p、GGA3 的关系;qRT-PCR检测A549 细胞中CircCPA4、miR-377-3p 表达;CCK-8 法检测A549 细胞增殖情况;流式细胞术检测A549 细胞凋亡;Transwell检测A549 细胞侵袭、迁移数量;Western blot检测A549 细胞GGA3、E-cadherin、Vimentin、N-cadherin的蛋白水平.结果 在肺癌组织和肺癌A549 细胞中CircCPA4、GGA3 水平显著上调(P<0.05),miR-377-3p表达量显著下调(P<0.05).与NC组、si-NC组比较,si-CircCPA4 组 A549 细胞 OD450 值、迁移、侵袭细胞数量、CircCPA4 表达量、GGA3、N-cadherin、Vimentin蛋白水平显著下降(P<0.05),A549 细胞凋亡率、miR-377-3p表达量、E-cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05);而 miR-377-3p 表达下调消除了沉默 CircCPA4 对 A549 细胞恶性生物学行为的抑制作用;CircCPA4 靶向调节miR-377-3p/GGA3 轴.结论 沉默CircCPA4 可能通过上调miR-377-3p来抑制GGA3 表达,抑制A549 细胞增殖、EMT,促进细胞凋亡.
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关键词
circular RNA carboxypeptidase A4(circCPA4),microRNA-377-3p(miR-377-3p),lung cancer,proliferation,apoptosis,epithelial-mesenchymal transformation,Golgi-localized gamma-ear-containing ARF-binding protein 3(GGA3)
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