微小RNA-1910-3p调控三方基序包含蛋白37影响非小细胞肺癌细胞生物学行为

目的 探讨微小RNA-1910-3p(miR-1910-3p)调控三方基序包含蛋白37(TRIM37)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞生物学行为的影响.方法 通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法评估人非小细胞肺癌细胞(A549细胞系)和人正常肺上皮细胞(BEAS-2B细胞系)中miR-1910-3p的表达水平.采用生物信息学分析、RT-qPCR、蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-1910-3p对TRIM37的靶向调控关系.A549细胞分别转染阴性对照模拟物(NC组)、miR-1910-3p模拟物(miRNA-mimic组)、miR-1910-3p抑制剂(miRNA-inhibitor组),细胞计数试剂盒(CCK-8)和克隆形成实验检测各组细胞增殖能力、膜联蛋白Ⅴ(Annexin Ⅴ)-异硫氰酸荧光素(FITC)实验检测各组细胞凋亡率、Transwell小室和细胞划痕实验分别检测各组细胞侵袭率和迁移率.两组间比较采用独立样本t检验.结果 RT-qPCR结果显示,A549细胞组中miR-1910-3p表达水平高于BEAS-2B细胞组(1.566±0.019 比 1.114±0.078,t=10.920,P＜0.01).生物信息分析结果显示,TRIM37 满足与miR-1910-3p的5'端2～8位种子区完全互补配对.RT-qPCR及Western blot结果显示,miR-1910-3p mimic 组 TRIM37 表达水平低于 mimic NC 组[RT-qPCR(0.787±0.050)比(1.025±0.024),t=10.446,P＜0.01;Western blot(0.124±0.003)比(0.223±0.003),t=47.047,P＜0.01];miR-1910-3p inhibitor 组 TRIM37 表达水平高于 inhibitor NC 组[RT-qPCR(1.518±0.067)比(1.074±0.077),t=10.620,P＜0.01;Western blot(0.730±0.005)比(0.243±0.004),t=123.124,P＜0.01].在NSCLC细胞中,miR-1910-3p mimic组细胞增殖能力、侵袭细胞数和细胞迁移率高于mimic NC组[相对细胞活力(122.50±4.08)％比(100.00±3.36)％,t=14.632,P＜0.01;克隆形成率(10.625± 0.917)％比(6.000±0.500)％,t=13.100,P＜0.01;侵袭细胞数(195.800±25.762)个 比(139.400±15.421)个,t=4.200,P＜0.01;细胞迁移率(46.330±4.163)％比(37.330±1.528)％,t=3.515,P＜0.05],细胞凋亡率低于 mimic NC 组[(3.393±0.486)％比(8.227±0.465)％,t=12.451,P＜0.05];miR-1910-3p inhibitor组细胞增殖能力、侵袭细胞数和细胞迁移率低于inhibitor NC 组[相对细胞活力(79.79±4.76)％比(100.00±2.31)％,t=12.914,P＜0.01;克隆形成率(5.169±0.391)％比(6.981±0.163)％,t=7.407,P＜0.05;侵袭细胞数(62.800±6.760)个 比(138.400±14.673)个,t=10.464,P＜0.01;迁移率(32.670±3.215)％比(39.330±1.528)％,t=3.244,P＜0.01],细胞凋亡率高于 inhibitor NC 组[(11.910±0.898)％比(6.320±0.584)％,t=9.041,P＜0.05].结论 miR-1910-3p通过负调控TRIM37影响非小细胞肺癌细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡.