原苏木素B抗结肠癌细胞的作用及机制

目的:研究原苏木素B(PSB)对人结肠癌SW620、SW480 细胞的增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响,并探讨其抗结肠癌细胞的作用及机制.方法:实验1:将SW620、SW480 细胞各分为7 组,分别为对照组(不加药物经DMSO处理)和PSB-1～PSB-6 组(分别给予 6.25 μg/ml、12.50 μg/ml、25.00 μg/ml、50.00 μg/ml、100.00 μg/ml和 200.00 μg/ml PSB),并分别处理24 h、48 h、72 h和96 h.实验2:将结肠癌SW620、SW480 细胞各分为 4 组:对照组(不加药物经DMSO处理)、PSB-7～PSB-9组(分别给予17.5 μg/ml、35.0 μg/ml和70.0 μg/ml PSB处理24 h);另外SW620 细胞中又分为实验 1 组(25.0 ng/ml IGF-1处理24 h)、实验2 组(25.0 ng/ml IGF-1+35.0 μg/ml PSB处理 24 h)、实验 3 组(1 μmol/L AZD2858 处理 24 h)和实验 4 组(1 μmol/L AZD2858+35.0 μg/ml PSB处理 24 h).检测 SW620、SW480 细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡情况、高尔基磷蛋白 3(GOLPH3)及SW620 细胞磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、磷酸化p70 核糖体蛋白S6 激酶(p-p70S6K)、β-连环蛋白(β-catenin)的表达水平.结果:PSB以浓度和时间依赖效应抑制SW620、SW480 细胞的增殖.在SW620 细胞中,PSB-8 组与对照组的细胞迁移数目分别为(367.67±8.18)个和(890.00±19.65)个,细胞侵袭数目分别为(122.33±9.18)个和(374.67±13.47)个,细胞凋亡率分别为(27.74±2.57)%和(6.13±0.45)%,PSB-7～PSB-9 组和对照组的GOLPH3 蛋白相对表达量分别为(0.52±0.03)、(0.36±0.03)、(0.07±0.01)和(0.96±0.12),PSB-8 组、对照组及实验 2 组中的 p-AKT 的蛋白相对表达量分别为(0.10±0.05)、(1.04±0.34)和(10.00±1.61),p-p70S6K的蛋白相对表达量分别为(0.40±0.14)、(1.05±0.12)和(2.52±0.29),β-catenin的蛋白相对表达量分别为(0.14±0.07)、(0.99±0.23)、(6.06±0.89),对照组、PSB-8 组、实验3 组和实验4 组的相对荧光强度值分别为(1.00±0.07)、(0.14±0.06)、(1.98±0.16)和(1.31±0.14),差异均有统计学意义(均P＜0.001);在SW480 细胞中,PSB-8 组与对照组的细胞迁移数目分别为(314.33±5.31)个和(589.67±22.87)个,细胞侵袭数目分别为(75.67±7.04)个和(196.33±11.90)个,细胞凋亡率分别为(22.05±0.90)%和(7.07±0.56)%,PSB-7～PSB-9 组和对照组的GOLPH3 蛋白相对表达量分别为(0.83±0.01)、(0.54±0.02)、(0.48±0.03)和(1.00±0.06),差异均有统计学意义(均P＜0.001).结论:PSB通过下调GOLPH3 表达,抑制PI3K/AKT/mTOR和Wnt/β-catenin信号通路,从而抑制结肠癌SW620、SW480 细胞的增殖、迁移、侵袭,并诱导其凋亡.