高内涵模型检测细胞焦亡用于抗炎药物筛选的实验教学设计

Journal of Biology(2023)

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Abstract
介绍为国家级大学生创新创业训练项目设计的采用高内涵模型检测细胞焦亡用于筛选抗炎药物实验教学实施结果.该实验利用NLRP3 炎症小体活化导致细胞焦亡的理论,使用高内涵对焦亡细胞进行计数,以确定化合物对NLRP3 炎症小体活化抑制情况,进而评价化合物抗炎活性强弱.实验结果表明:NLRP3 炎症小体活化时细胞会发生焦亡,PI能够对焦亡的细胞染红色荧光,Hoechst 33342 能够对所有细胞染蓝色荧光.加入待筛选的化合物后,利用高内涵对不同荧光下的细胞进行计数,通过二者比值确定化合物的NLRP3 炎性小体活化抑制活性,从而用于抗炎药物筛选.实验将PI/Hoechst 33342 染色与高内涵结合使用,有效解决了经费不足和大型仪器设备缺乏等问题,实验成本较低,结果直观便捷,能够让学生深入、系统地了解细胞焦亡的实验原理和检测方法,让参加大学生创新创业项目的学生在掌握细胞生物学基本实验技能的同时进一步了解新药研发的基本流程,有效培养学生创新创业意识与科学素养.
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Key words
pyroptosis,experimental teaching,high content screening,NLRP3 inflammasome inhibitor,anti-inflammatory activity
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