DNMT3A对骨关节炎软骨细胞SOX9基因DNA甲基化修饰的影响

Orthopaedic Biomechanics Materials and Clinical Study(2023)

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Abstract
目的 探讨DNMT3A对SOX9基因DNA甲基化修饰的影响.方法 培养正常软骨细胞和OA软骨细胞,显微镜下观察软骨细胞形态,甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原染色鉴定软骨细胞,qRT-PCR、Western Blot检测DNMT3A、SOX9 mRNA和蛋白表达水平,亚硫酸氢盐测序检测SOX9基因DNA甲基化状态,慢病毒沉默DNMT3A观察SOX9基因DNA甲基化修饰的变化.结果 正常软骨细胞形态规则,体积较大,数量较多,OA软骨细胞形态不规则,体积较小,数量较少.与正常软骨细胞比较,OA软骨细胞中DNMT3A mRNA和蛋白表达量增高(P<0.05),SOX9 mRNA和蛋白表达量明显降低(P<0.05),SOX9基因DNA甲基化百分比增高.在OA软骨细胞中沉默DNMT3A后,SOX9基因DNA甲基化百分比明显降低.结论 DNMT3A调节SOX9基因DNA甲基化修饰参与OA软骨细胞病变.
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Key words
Osteoarthritis,Chondrocytes,DNMT3A,SOX9,DNA methylation
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