环状RNA ITCH对高糖诱导的心脏成纤维细胞活化的影响与机制研究

目的 探讨环状RNA ITCH(Circ-ITCH)对高糖诱导的心脏成纤维细胞(CF)活化的影响及其机制.方法 体外培养人CF(HCF),按照处理方法的不同分为对照组、高糖组、过表达载体阴性对照(OV-NC)组、Circ-ITCH过表达载体(OV-Circ-ITCH)组;模拟物阴性对照[微小 RNA(miR)-NC]组、miR-212-3p 模拟物(miR-212-3p mimics)组、抑制物阴性对照(inhibitor-NC)组、miR-212-3p抑制物(miR-212-3p inhibitor)组;Circ-ITCH过表达载体+模拟物阴性对照(OV-Circ-ITCH+miR-NC)组、Circ-ITCH 过表达载体+miR-212-3p 模拟物(OV-Circ-ITCH+miR-212-3p mimics)组、Circ-ITCH 过表达载体+小分子干扰 RNA 阴性对照(OV-Circ-ITCH+si-NC)组和 Circ-ITCH过表达载体+Samd同源物7小分子干扰RNA(OV-Circ-ITCH+si-Smad7)组,除对照组外,其余各组转染12 h后采用30 mmol/L D-葡萄糖处理进行高糖诱导,检测Circ-ITCH、miR-212-3p、Smad7表达、细胞活力及胶原纤维沉积,并验证miR-212-3p与Circ-ITCH、Smad7靶向关系.结果 与对照组比较,高糖组Circ-ITCH、Smad7 mRNA和蛋白表达降低(0.45±0.05 vs 0.99±0.07,0.51±0.06 vs 0.99±0.08,0.68±0.05 vs 1.16±0.07,P＜0.05),miR-212-3p表达升高(2.17±0.12 vs 1.01±0.08,P＜0.05),Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达及细胞活力升高(P＜0.05),胶原纤维沉积增多.Circ-ITCH过表达升高高糖诱导的HCF细胞中Smad7表达,降低miR-212-3p、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α-SMA表达及细胞活力,减少胶原纤维沉积.miR-212-3p过表达抑制高糖诱导的HCF细胞中Smad7表达,而抑制miR-212-3p表达则相反.miR-212-3p过表达或抑制Smad7表达均减弱Circ-ITCH过表达对高糖诱导的HCF细胞增殖、胶原纤维沉积的影响.HCF细胞中miR-212-3p与Circ-ITCH、Smad7存在靶向关系.结论 Circ-ITCH靶向抑制miR-212-3p并上调Smad7表达,抑制高糖诱导的HCF细胞活化.