氯化锂激活Wnt／β-catenin信号通路致小鼠造血干／祖细胞衰老及其机制

目的探讨氯化锂（LiCl）激活Wnt／β-catenin信号通路致小鼠Sca-1^＋造血干／祖细胞（Sca-1^＋HSC／HPC）衰老及其机制。方法免疫磁珠法分离纯化小鼠Sca-1^＋HSC／HPC。纯化后细胞分为：正常对照组，常规培养；LiCl组，正常对照组基础上，加入LiCl（终浓度10mmol／L）；D-半乳糖致衰组，正常对照组基础上，加入D一半乳糖（终浓度166mmol／L），各组培养48h。造血祖细胞混合集落（CFU—Mix）培养检测Sca-1^＋HSC／HPC多向分化潜能，细胞计数试剂盒-8（CCK-8）检测Sca-1^＋HSC／HPC增殖能力，衰老相关β-半乳糖苷酶（SA—β-Gal）染色检测细胞衰老，免疫细胞化学染色和Western blotting检测细胞内β-catenin、糖原合成激酶3β（GSK-3p）、P53、P21蛋白表达，ELISA检测细胞胞质内8羟基脱氧鸟苷（β-OH-dG）含量。结果与正常对照组相比，LiCl组与D-半乳糖致衰组Sca-1^＋HSC／HPC增殖能力下降，形成CFU-Mix数量下降，SA—D—Gal染色阳性细胞百分率增加，β-catenin、P53、P21蛋白表达上调，GSK-3B蛋白表达下调，细胞内8-OH—dG水平升高。结论LiCI可通过激活Wnt／β-catenin信号通路，使细胞DNA氧化损伤，上调P53／P21途径，这可能是导致小鼠造血干／祖细胞衰老的机制之一。