粉防己碱对膀胱癌BIU-87／ADM细胞株的耐药逆转作用及其机制

目的探讨粉防己碱（TET）对膀胱癌耐药株BIU-87／ADM多药耐药性（MDR）的逆转作用及其机制。方法应用CCK法观察不同浓度TET（1．0、1．5、2．0、2．5mg／L）对BIU-87和BIU-87／ADM细胞生长的抑制作用，并测定1mg／LTET逆转多药耐药的活性；Annexin—V与PI双染法流式细胞术分析1mg／LTET对细胞凋亡的影响；免疫荧光法和逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）分别检测1mg／LTET对P-gP蛋白和MDRl表达水平的影响；细胞免疫化学法和RT—PCR法检测1mg/LTET对BIU-87／ADM细胞Easpase-3和Survivin表达水平的影响。结果1．0mg／L无毒剂量下的TET显著增加阿霉素（ADM）对耐药株BIU-87／ADM的细胞毒性作用（P〈0．01），逆转指数（RV）为5．33，而对敏感株BIU-87无明显作用（P〉0．05），RF为1．33；1．0mg／LTET和1．5mg／LADM共同作用48h，能使BIU-87／ADM细胞凋亡率增加至（40．86±4．35）％，与单独应用ADM的（12．42±3．24）％比较差异有统计学意义（P〈0．01）。而BIU-87细胞凋亡率为（61．23±5．46）％，与单独应用ADM的（57．79±4．73）％比较差异无统计学意义（P〉0．05）。TET能明显抑制mdrlmRNA和P-gP蛋白在BIU-87／ADM的表达；与单用ADM比较，TET和ADM联用能使BIU-87／ADM细胞株中Caspase．3的表达水平明显升高（P〈0．01），Survivin的表达水平显著降低（P〈0．01）。结论粉防己碱能逆转BIU-87／ADM细胞的多药耐药性，这一作用可能与粉防己碱抑制P-gP的表达和增强化疗药诱导细胞凋亡有关。