Der Einfluss der BTK auf EMT, CSC Anreicherung und das Immunsystem/das Tumormikromilieu in HNSCC

Hintergrund Konstitutiv aktive Kinasen sind Hauptcharaktere in der Karzinogenese und ihre Unterdrückung wird vielfach in der molekularen Tumortherapie angewendet. Wir identifizierten Brutons Tyrosin Kinase (BTK) in Hals-/Kopftumoren (HNSCC). Um die Rolle der BTK in der Tumorentstehung besser zu verstehen, untersuchten wir drei HNSCC Zelllinien in vitro in 3D Kultur in Bezug auf ihre Fähigkeit zu metastasieren, zu differenzieren und das Tumor-Immun-Mikromilieu zu verändern. M & M: Zwei verschiedene 3D Kultur-Systeme wurden verwendet: Zellen als Kolonien in Matrigel und als „floating spheres“ auf „ultra low attachment surface plates (ULAs)“. Zellen wurden für 72h nach Behandlung mit BTK-Inhibitor (AVL-292) oder Kontrolle kultiviert. Epithelial-Mesenchymaler-Transition (EMT)-, Immuncheckpoint- (BTLA, CTLA4, PD-1) und Krebs-Stammzellen (CSC) assoziierte Moleküle wurden mit Western Blots und Durchflusszytometrie analysiert, Zytokine (IFNg, TNFα, IL6) durch ELISA-Verfahren nachgewiesen. ERK und NF-kB Aktivierung wurden analysiert.