利用Cre-Loxp技术构建标记肝星状细胞的小鼠模型
Acta Universitatis Medicinalis Anhui(2023)
Abstract
目的 通过 Cre-Loxp 技术构建转基因小鼠,应用LratCre工具鼠示踪肝星状细胞分布.方法 将LratCre小鼠与H11 LoxP-ZsGreen-Stop-LoxP-tdTomato报告基因小鼠交配,通过PCR鉴定得LratCre H11LoxP-ZsGreen-Stop-LoxP-tdTomato报告基因小鼠.固定小鼠肝脏切片,借助免疫荧光标记肝脏非实质细胞抗体,通过Imaris 3D还原分析肝星状细胞和其他肝脏非实质细胞间的表达与分布,以及进行肝星状细胞的自定位检验.结果 LratCre介导的红色荧光蛋白tdTomato的表达可以特异性标记肝星状细胞,并通过肝星状细胞与肝脏巨噬细胞、肝窦内皮细胞的免疫荧光定位为细胞间相互作用分析提供了途径.结论LratCre可以介导tdTomato对肝星状细胞进行示踪,同时可用做肝星状细胞特异性的报告基因工具鼠.
MoreKey words
hepatic stellate cells,Kupffer cells,hepatic sinusoidal endothelial cells,reporter mouse,Cre-LoxP
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