奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌nuc基因LAMP检测方法的建立

LUO Yang, TIAN Wei-jia, HE Fang,LIU Bo-cheng,HUAN Cheng, WANG Chang-bin, YANG Qing,YI Kang-le

Progress in Veterinary Medicine（2023）

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摘要

为了快速鉴定因金黄色葡萄球菌感染引起的奶牛乳房炎,采用环介导等温扩增(LAMP)技术和传统PCR技术,针对金黄色葡萄球菌nuc 基因设计特异性引物并进行扩增鉴定,同时对两种鉴定方法的最适反应条件、灵敏度和特异性进行了研究.结果显示,LAMP 和传统 PCR 均能成功扩增金黄色葡萄球菌的nuc 基因,但通过优化LAMP反应条件,在 62℃时对nuc 基因呈现最佳扩增效果,与传统 PCR 鉴定方法相比,LAMP对金黄色葡萄球菌nuc 基因最低检测浓度为 50 fg/μL,其检测灵敏度是 PCR 的 104 倍.说明LAMP能精准鉴定因金黄色葡萄球菌引起的奶牛乳房炎,且针对nuc 基因的鉴定操作简单、特异性强、灵敏度高.

关键词

Dairy cow mastitis,Staphylococcus aureus,nuc gene,loop-mediated isothermal amplification(LAMP)

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