三相中空纤维液相微萃取-高效液相色谱法测定铁皮石斛和金线莲中3种植物生长调节剂

在铁皮石斛和金线莲药材的人工培育过程中通常需要使用各种植物生长调节剂(PGRs),然而使用过量的PGRs不仅会影响药材的品质和疗效,而且会引发一系列的安全性问题,因此建立精准分析测定药材中残留的痕量PGRs技术方法具有重要意义.本研究基于三相中空纤维液相微萃取(3P-HF-LPME)-高效液相色谱法,建立了一种同时测定铁皮石斛和金线莲药材中吲哚乙酸、吲哚丁酸、萘乙酸3 种PGRs的分析方法.首先通过参数优化确定最佳色谱条件,然后采用超声+低温静置的提取手段制备样本溶液,优化影响 3P-HF-LPME萃取效果的各个参数.确定的最佳前处理过程如下:以正辛醇作为中间相(萃取剂),pH 11.0 的氢氧化钠溶液作为内相,稀盐酸调节外相溶液pH值为 3.0,并在外相溶液中添加质量浓度为 150 g/L的氯化钠溶液,在温度为 40℃、搅拌速度为 1600 r/min条件下萃取 2.0 h.3 种PGRs采用Welch Ultimate XB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)进行分离,以乙酸水溶液-甲醇(45∶55,v/v)为流动相进行等度洗脱.实验结果表明,在优化的条件下,所测定的 3 种PGRs在0.5～100.0 μg/L范围内线性关系良好(决定系数(r2)= 0.999 9),检出限(LOD)为 0.02～0.15 μg/L,加标回收率为 88.5%～102.2%,相对标准偏差(RSD)≤3.7%(n=3).该方法对铁皮石斛和金线莲药材中3 种PGRs的萃取效率为 42.0%～86.8%,富集倍数为 140～289.该方法灵敏、准确、可靠、环保,且富集倍数高,适用于铁皮石斛和金线莲药材中残留的微量酸性PGRs的检测.