LC-MS/MS法同时测定人血浆中维拉帕米和代谢产物去甲维拉帕米

建立一种简便、灵敏的同时测定人血浆中维拉帕米和去甲维拉帕米浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)的分析方法,并用于健康人体的药代动力学研究.血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,使用Agilent Zorbax EclipseC18色谱柱(50 mm×4.6 mm,5μm)分离,以0.1％甲酸-5％乙腈-10 mmol·L-1甲酸铵水溶液作为水相,甲醇-乙腈(50∶50,v/v)溶液作为有机相,0.5 mL·min-1的流速进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源(ESI),多反应(MRM)正离子监测模式对维拉帕米、去甲维拉帕米及内标维拉帕米-d6进行定量检测,监测离子对分别为m/z445.0→ 165.2、m/z441.0→165.2和m/z461.1→165.2.本文建立的同时测定人血浆中维拉帕米及去甲维拉帕米浓度的LC-MS/MS方法的定量下限(LLOQ)为0.1 ng·mL-1,且在0.1～50 ng·mL-1浓度内线性关系良好(r2＞ 0.997).维拉帕米及去甲维拉帕米的基质效应分别在99.2％～100％和101％～102％之间,该方法前处理简便快速,灵敏度高,能准确同时测定人血浆中维拉帕米及去甲维拉帕米浓度,方法验证后并经伦理委员会批准后应用于健康人体的药动学研究.