miR-21-5p调控FGF18表达对结肠癌肿瘤干细胞生物学行为影响

XI Xiaozhong, LI Guoqiang, XIAO Lei,YAO Kunhou

Acta Aacademiae Medicinae Qingdao Universitatis(2021)

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Abstract
目的 探究miR-21-5p调控成纤维细胞生长因子18(FGF18)表达对结肠癌肿瘤干细胞生物学行为作用及机制.方法 应用流式细胞分选术筛选CD133+/CD44+结肠癌干细胞,并行细胞培养、分组及质粒转染.分别应用CCK-8法、Transwell小室法、流式细胞术检测细胞增殖、迁移和侵袭能力及凋亡率.应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-21-5p及FGF18 mRNA表达水平,Western blotting检测CD44、CD133和FGF18蛋白表达水平.结果 FGF18为miR-21-5 p靶基因.与空白(Blank)组和阴性对照(NC)组相比,miR-21-5 p模拟物(miR-21-5p mimic)组CD133+/CD44+细胞增殖抑制率和凋亡率显著降低,迁移、侵袭能力显著提升,CD44、CD133和FGF18表达水平显著上升(F=11.23~886.10,P均<0.05);miR-21-5p抑制剂(miR-21-5p inhibitor)组和FGF18沉默表达(si-FGF18)组细胞增殖抑制率和凋亡率显著升高,迁移、侵袭能力显著降低,CD44、CD133和FGF18表达水平显著下调(F=10.23~764.70,P均<0.05);而si-FGF18+miR-21-5p mimic组与Blank组和NC组比较差异无统计学意义(P均>0.05).结论 下调miR-21-5p表达并沉默FGF18表达,可抑制结肠癌肿瘤干细胞增殖、迁移和侵袭,并促进其凋亡.
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